Калязинский краеведческий музей основан в 1920 г. Первая экспозиция была открыта на территории Макарьевской обители. Основателем музея и его бессменным руководителем на протяжении 52 лет был И.Ф. Никольский (1898-1979 гг.).
Основную коллекцию музея в 1920 году составили «памятники старины», хранившиеся в монастыре, коллекции монастырских икон, одежда церковнослужителей, библиотека монастыря, церковная утварь.
В 1940 году монастырь попал в зону затопления и был разобран, музей переехал в другое здание, Богоявленскую церковь (1781 г.) на Зареченской части города. Здесь он находится и в настоящее время.
В 1977 году Калязинский краеведческий музей входит в состав Тверского объединения музеев области. В 1982 году музей закрывается на реставрацию, а в 1992 году открывается действующая и по сегодняшний день экспозиция в помещении трапезной Богоявленского храма.
Музей является хранителем очень разнообразной по своему составу коллекции. Это не только предметы и документы, связанные с историей региона. Это, прежде всего коллекция Троицкого Калязинского Макарьевского монастыря, фрески, иконы, редкие книги, монументальная живопись, гравюры и литографии, фотоматериалы. Богатый фонд декоративного искусства, мебели, парковая и мемориальная скульптура. Собрание музея позволяет вести рассказ о создании жилой среды человека, отражая накопленный веками культурный и художественный потенциал, характерный для юго-восточной территории Тверского княжества и соседних регионов.